EPO修饰增强Müller细胞对RCS大鼠视网膜变性的干预效果

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2014年第4卷第1期 栏目: 论著

作者:李宗义,李鹏,高芙蓉等

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页码:52-59

摘要:

 

【摘要】 目的 研究人源促红细胞生成素(hEPO)修饰的Müller(hEPO-Müller)细胞对视网膜退行性病变大鼠的干预作用。方法 通过质粒转染法构建hEPO和GFP的Müller细胞稳转株(hEPO-Müller和GFP-Müller);以体外共培养和体内细胞移植为研究体系,利用RT-PCR和冰冻切片及免疫荧光染色的方法检测hEPO-Müller对RCS大鼠视网膜退行性病变的干预作用。内核层与外核层厚度比较采用t检验。结果 本实验成功构建了hEPO-Müller和GFP-Müller细胞系。将RCS大鼠的视网膜组织剥离并在体外不同条件下培养两周后测定视网膜各核层厚度发现,与对照细胞裂解液共培养组的内核层(15.94 ± 1.77)μm和外核层(24.81 ± 3.03)μm的厚度相比较,两核层的厚度分别在hEPO组为(23.03 ± 3.29)μm,(33.92 ± 7.59)μm(P < 0.05);Müller组为(24.81 ± 2.02)μm,(32.15 ± 3.03)μm(P < 0.05);hEPO-Müller 组为(32.40 ± 8.35)μm,(40.25 ± 3.29)μm(n=3,P < 0.01);以hEPO-Müller 组厚度增加最为显著(P < 0.05)。提示EPO和Müller细胞对视网膜变性都有干预作用且两者可以叠加。将hEPO-Müller和GFP-Müller 分别移植到RCS大鼠的视网膜下腔,四周后取视网膜进行冰冻切片检测,染色结果显示,细胞移植后有更多的外核层细胞存活,且同样也是hEPO-Müller组的外核层细胞更多。此外,Müller移植并不会促进视网膜的胶质化。结论 移植Müller细胞可以减缓RCS大鼠视网膜变性,而经hEPO修饰的Müller细胞对视网膜变性有更好的干预作用。因此,Müller细胞可以作为一种供体细胞兼携带hEPO等营养因子的载体用于视网膜变性的治疗。
【关键词】 细胞移植; 视网膜变性; 红细胞生成素; Müller细胞
 
 
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