增强型绿色荧光蛋白标记兔间充质干细胞体外复合小肠黏膜下层的生长特性

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2014年第4卷第4期 栏目: 论著

作者:宋焕瑾,姬钢,兰宾尚等

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页码:251-255

摘要:

【摘要】 目的 利用绿色荧光蛋白标记兔来源的间充质干细胞(BMSC),观察其作为种子细胞复合SIS基质体外培养的生长特性,为复合物回植体内时间提供参考。方法 通过物理和化学方法制备小肠黏膜下层(SIS);取新西兰大白兔分离骨髓间充质干细胞,体外培养增殖至P3代,行转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP),转染前后根据增殖速度,绘制生长曲线。然后将转染后的第3代间充质干细胞,以30 × 106的浓度接种于1 cm × 1 cm大小的SIS支架材料上培养。观察细胞转染后的生长特性,检测复合后的细胞总数,荧光显微镜观察复合后细胞形态。结果 间充质干细胞经转染后生长增殖速度未受明显影响。细胞DNA检测显示复合物培养第7天培养结果显示细胞增殖状态最佳差异有统计学意义(P < 0.05)。荧光显微镜观察显示复合物培养7天细胞增殖良好差异有统计学意义(P < 0.05),第10天后磁暴呈现老化状态。结论 增强型的绿色荧光蛋白转染不影响间充质干细胞传代以及增殖。间充质干细胞-SIS基质复合物体外培养7 d左右回植较为合适。
【关键词】 间充质干细胞; 肠黏膜; 绿色荧光蛋白质类