高剂量pSin慢病毒载体介导的转染对诱导性多能干细胞影响的研究

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2017年第7卷第3期 栏目: 论著

作者:黄乙涓,黄强,吕欧

单位:

关键词:

页码:125-130

摘要:

【摘要】 目的 研究慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的诱导性多能干细胞(iPS),细胞形态和传代的影响。方法 通过包装慢病毒pSin-GFP感染iPS,分为实验组(细胞与病毒滴度比例1 : 200)和对照组(细胞与病毒滴度比例1 : 1)感染人iPS,经过嘌呤霉素药物筛选获得单克隆,重复3次实验观察细胞形态学变化记录细胞每代克隆数,采用方差分析及t检验进行统计学分析数据结果,用免疫荧光和werstern检测iPS标志蛋白表达。结果 pSin-GFP病毒感染iPS后挑取24个单克隆细胞株,传十代后实验组(4.67±0.33)明显少于对照组(16.00±0.58)的细胞克隆数(t =17.00,P < 0.01),实验组细胞状态稳定并正常表达Oct-4、Sox2、SSEA-1、Nanog和Tra-1-60。结论 使用1 : 200的高比例慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的iPS可传代次数减少,形态学并未发生变化,其正常表达的干细胞标志性蛋白。
【关键词】 多能干细胞; 慢病毒属; 基因修饰
【摘要】 目的 研究慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的诱导性多能干细胞(iPS),细胞形态和传代的影响。方法 通过包装慢病毒pSin-GFP感染iPS,分为实验组(细胞与病毒滴度比例1 : 200)和对照组(细胞与病毒滴度比例1 : 1)感染人iPS,经过嘌呤霉素药物筛选获得单克隆,重复3次实验观察细胞形态学变化记录细胞每代克隆数,采用方差分析及t检验进行统计学分析数据结果,用免疫荧光和werstern检测iPS标志蛋白表达。结果 pSin-GFP病毒感染iPS后挑取24个单克隆细胞株,传十代后实验组(4.67±0.33)明显少于对照组(16.00±0.58)的细胞克隆数(t =17.00,P < 0.01),实验组细胞状态稳定并正常表达Oct-4、Sox2、SSEA-1、Nanog和Tra-1-60。结论 使用1 : 200的高比例慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的iPS可传代次数减少,形态学并未发生变化,其正常表达的干细胞标志性蛋白。
【关键词】 多能干细胞; 慢病毒属; 基因修饰
【摘要】 目的 研究慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的诱导性多能干细胞(iPS),细胞形态和传代的影响。方法 通过包装慢病毒pSin-GFP感染iPS,分为实验组(细胞与病毒滴度比例1 : 200)和对照组(细胞与病毒滴度比例1 : 1)感染人iPS,经过嘌呤霉素药物筛选获得单克隆,重复3次实验观察细胞形态学变化记录细胞每代克隆数,采用方差分析及t检验进行统计学分析数据结果,用免疫荧光和werstern检测iPS标志蛋白表达。结果 pSin-GFP病毒感染iPS后挑取24个单克隆细胞株,传十代后实验组(4.67±0.33)明显少于对照组(16.00±0.58)的细胞克隆数(t =17.00,P < 0.01),实验组细胞状态稳定并正常表达Oct-4、Sox2、SSEA-1、Nanog和Tra-1-60。结论 使用1 : 200的高比例慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的iPS可传代次数减少,形态学并未发生变化,其正常表达的干细胞标志性蛋白。
【关键词】 多能干细胞; 慢病毒属; 基因修饰