碱性成纤维生长因子转染骨髓间充质干细胞移植对心肌病心力衰竭大鼠心功能的影响

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2017年第7卷第5期 栏目: 论著

作者:赖增华,窦学凯,贾春文,姜朝晖

单位:

关键词:

页码:271-276

摘要:

【摘要】 目的 探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌病心力衰竭大鼠心功能的影响。方法 通过腹腔注射阿霉素建立心肌病心力衰竭SD大鼠模型,存活33只大鼠随机分成3组:模型组、BMSCs组和BMSCs+bFGF组,每组11只。另设正常对照组(n = 8)。取体外培养的第三代SD大鼠BMSCs,质粒-bFGF转染BMSCs,BrdU标记后,分别将BMSCs(3×106个)、bFGF转染的BMSCs(3×106个)或等体积培养基通过尾静脉注射的方法进行移植。用生物信号采集系统检测大鼠心功能,大鼠心脏切片行免疫组化了解移植细胞在受体心脏的存活情况,实时荧光定量PCR和Western Blotting检测心室组织bFGF的表达水平。多组间比较采用单因素方差分析或精确概率法。结果 BMSCs移植4周后,正常对照组大鼠的心功能指标LVSP(121.13±12.28)mmHg,LVDEP(3.86±1.25)mmHg,LV+dP/dt(3671.25±172.50)mmHg/s和LV-dP/dt(3221.63±259.57)mmHg/s;模型组心功能指标LVSP(81.29±12.39)mmHg,LVDEP(16.43±4.12)mmHg,LV+dP/dt(2344.29 ±98.63)mmHg/s和LV-dP/dt(2244.29±103.10)mmHg/s;BMSCs组心功能指标LVSP(97.00 ±6.39)mmHg,LVDEP(12.00±2.73)mmHg,LV+dP/dt(2876.25±118.31)mmHg/s和LV-dP/dt(2726.25 ± 303.23)mmHg/s;BMSCs+bFGF组心功能指标LVSP(109.38±12.78)mmHg,LVDEP(9.25 ±1.67)mmHg,LV+dP/dt(3037.50±161.22)mmHg/s和LV-dP/dt(3000.13±149.77)mmHg/s,移植组各指标均有改善,比较差异有统计学意义(F = 17.29、36.61、111.11、26.54,P均< 0.01)。免疫组织化学检查示细胞移植组大鼠的心室组织切片上可见BrdU阳性细胞存在。模型组大鼠心室心肌组织bFGF mRNA表达水平高于正常对照组(1.28±0.06 vs 1.00±0.00,t = 10.46,P < 0.01),BMSCs组高于模型组(1.37±0.05 vs 1.28±0.06,t=3.39,P < 0.01),而BMSCs+bFGF组高于BMSCs组(1.44±0.03 vs 1.37±0.05,t =2.86,P = 0.01)。Western Blotting示,正常对照组大鼠心室组织bFGF蛋白表达最低,模型组高于正常对照组(1.31±0.09 vs 1.00 ±0.00,t = 5.48,P = 0.01),BMSCs组高于模型组(1.46±0.05 vs 1.31±0.09,t = 2.68,P = 0.03),而BMSCs+bFGF组高于BMSCs组(1.84±0.09 vs 1.46±0.05,t = 6.79,P < 0.01)。结论 转染bFGF基因的BMSCs移植可提高阿霉素所致心肌病心力衰竭大鼠心脏的bFGF水平,改善大鼠心功能,其效果优于单纯BMSCs移植。
【关键词】 碱性成纤维生长因子; 间充质干细胞; 细胞移植; 心力衰竭
【摘要】 目的 探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌病心力衰竭大鼠心功能的影响。方法 通过腹腔注射阿霉素建立心肌病心力衰竭SD大鼠模型,存活33只大鼠随机分成3组:模型组、BMSCs组和BMSCs+bFGF组,每组11只。另设正常对照组(n = 8)。取体外培养的第三代SD大鼠BMSCs,质粒-bFGF转染BMSCs,BrdU标记后,分别将BMSCs(3×106个)、bFGF转染的BMSCs(3×106个)或等体积培养基通过尾静脉注射的方法进行移植。用生物信号采集系统检测大鼠心功能,大鼠心脏切片行免疫组化了解移植细胞在受体心脏的存活情况,实时荧光定量PCR和Western Blotting检测心室组织bFGF的表达水平。多组间比较采用单因素方差分析或精确概率法。结果 BMSCs移植4周后,正常对照组大鼠的心功能指标LVSP(121.13±12.28)mmHg,LVDEP(3.86±1.25)mmHg,LV+dP/dt(3671.25±172.50)mmHg/s和LV-dP/dt(3221.63±259.57)mmHg/s;模型组心功能指标LVSP(81.29±12.39)mmHg,LVDEP(16.43±4.12)mmHg,LV+dP/dt(2344.29 ±98.63)mmHg/s和LV-dP/dt(2244.29±103.10)mmHg/s;BMSCs组心功能指标LVSP(97.00 ±6.39)mmHg,LVDEP(12.00±2.73)mmHg,LV+dP/dt(2876.25±118.31)mmHg/s和LV-dP/dt(2726.25 ± 303.23)mmHg/s;BMSCs+bFGF组心功能指标LVSP(109.38±12.78)mmHg,LVDEP(9.25 ±1.67)mmHg,LV+dP/dt(3037.50±161.22)mmHg/s和LV-dP/dt(3000.13±149.77)mmHg/s,移植组各指标均有改善,比较差异有统计学意义(F = 17.29、36.61、111.11、26.54,P均< 0.01)。免疫组织化学检查示细胞移植组大鼠的心室组织切片上可见BrdU阳性细胞存在。模型组大鼠心室心肌组织bFGF mRNA表达水平高于正常对照组(1.28±0.06 vs 1.00±0.00,t = 10.46,P < 0.01),BMSCs组高于模型组(1.37±0.05 vs 1.28±0.06,t=3.39,P < 0.01),而BMSCs+bFGF组高于BMSCs组(1.44±0.03 vs 1.37±0.05,t =2.86,P = 0.01)。Western Blotting示,正常对照组大鼠心室组织bFGF蛋白表达最低,模型组高于正常对照组(1.31±0.09 vs 1.00 ±0.00,t = 5.48,P = 0.01),BMSCs组高于模型组(1.46±0.05 vs 1.31±0.09,t = 2.68,P = 0.03),而BMSCs+bFGF组高于BMSCs组(1.84±0.09 vs 1.46±0.05,t = 6.79,P < 0.01)。结论 转染bFGF基因的BMSCs移植可提高阿霉素所致心肌病心力衰竭大鼠心脏的bFGF水平,改善大鼠心功能,其效果优于单纯BMSCs移植。
【关键词】 碱性成纤维生长因子; 间充质干细胞; 细胞移植; 心力衰竭