齐墩果酸通过PPARγ调控人脐静脉内皮细胞抗氧化损伤作用

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2017年第7卷第6期 栏目: 论著

作者:朱宝华,谷春景,刘凤莲,等

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页码:327-333

摘要:

【摘要】 目的 探讨齐墩果酸(OA)对ox-LDL诱导的内皮细胞氧化损伤的作用及其机制。方法 实验分组:对照组,ox-LDL模型组,ox-LDL+OA(10 μmol/L,20 μmol/L,40 μmol/L)组,ox-LDL+OA(10 μmol/L,20 μmol/L,40 μmol/L)+GW9662,GW9662单独处理组。采用MTT法检测HUVECs细胞活力;酶联免疫吸附试验法检测HUVECs细胞SOD活力、GSH活力以及MDA含量;活性氧检测试剂盒检测HUVECs细胞ROS水平;Western blot检测HUVECs细胞PPARγ蛋白表达水平,所有指标的检测都进行生物学重复。采用方差分析和两样本t检验进行统计学分析。结果 MTT结果显示,ox-LDL组的细胞存活率为(49.17±0.62)﹪,OA(10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L)预处理后存活率分别为(68.51±1.16)﹪、(82.64±0.73)﹪、(92.37±0.13)﹪,可减弱ox-LDL对HUVECs细胞存活率的降低且呈剂量依赖性关系,差异具有统计学意义(t = 24.35,26.18,35.17;P = 0.034,0.027,0.008)。本研究还发现,OA对ox-LDL诱导的HUVECs细胞SOD、GSH活性的降低和MDA、ROS水平的增加具有抑制作用且呈剂量依赖关系。ox-LDL组的细胞SOD、GSH、ROS和MDA水平分别为(16.12±0.06)μmol/g、(132.16 ± 2.11)μmol/g、(2.63±0.02)kU/g、(158.12±0.39)﹪,ox-LDL+OA(10 μmol/L)组的细胞SOD、GSH、ROS和MDA水平分别为(10.60±0.14) μmol/g、(108.36±2.05) μmol/g、(2.41 ±0.21)kU/g、(136.18±1.24)﹪,ox-LDL+OA(20 μmol/L)组的细胞SOD、GSH、ROS和MDA水平分别为(13.28±0.09)μmol/g、(129.58±0.09)μmol/g、(2.26±0.15)kU/g、(126.43±1.51)﹪,ox-LDL+OA(40 μmol/L)组的细胞SOD、GSH、ROS和MDA水平分别为(14.86±0.16)μmol/g、(131.47±0.76)μmol/g、(2.14±0.08)kU/g、(112.39±1.07)﹪(F = 26.38,31.27,56.82,41.16;P = 0.005,0.004,0.002,0.003)。Western blot结果显示,OA有效促进HUVECs细胞PPARγ蛋白水平提高。与ox-LDL+OA(20 μmol/L)组(65.37±0.15)﹪比较,ox-LDL+OA(20 μmol/L)+ GW9662组的细胞活力为(52.89±0.16)﹪,差异有统计学意义(t =16.47,P = 0.035)。进一步发现ox-LDL+OA(10 μmol/L)组SOD、GSH、MDA、ROS水平为(10.58 ± 0.13)μmol/g、(102.46 ± 0.06)μmol/g、(2.42 ± 0.08)kU/g、(144.38 ±2.02)﹪,ox-LDL+OA(10 μmol/L)+GW9662组的SOD、GSH、MDA、ROS水平分别为(8.42±0.05)μmol/g、(88.38±0.48)μmol/g、(2.83 ± 0.01)kU/g、(154.41 ± 1.04)﹪,两组比较差异有统计学意义(t = 38.47,39.25,43.69,41.27;P = 0.008,0.008,0.006,0.006);ox-LDL+OA(20 μmol/L)组SOD、GSH、MDA、ROS水平(13.25 ± 0.05)μmol/g、(122.59 ± 0.33)μmol/g、(2.23±0.16)kU/g、(123.94± 0.15)﹪,ox-LDL+ OA(20 μmol/L)+ GW9662组的SOD、GSH、MDA、RO水平分别为(10.59± 0.12)μmol/g、(106.42 ± 0.15)μmol/g、(2.61 ± 0.07)kU/g、(138.12 ± 1.15)﹪,两组比较差异有统计学意义(t = 46.08,38.11,49.35,35.59;P = 0.005,0.008,0.004,0.009);ox-LDL+OA(40 μmol/L)组SOD、GSH、MDA、ROS水平分别为(15.88±0.14)μmol/g、(140.26±1.05)μmol/g、(2.02 ± 0.13)kU/g、(187.52 ± 0.68)﹪,ox-LDL+OA(40 μmol/L)+GW9662组的SOD、GSH、MDA、RO水平(13.65 ± 0.03)μmol/g、(124.61 ± 1.27)μmol/g、(2.49±0.04)kU/g、(126.51± 0.73)﹪,两组比较差异有统计学意义(t = 48.04,38.62,45.14,50.13;P = 0.004,0.008,0.005,0.002),此外,本研究还发现,抑制PPARγ后,OA抑制ox-LDL诱导的HUVECs细胞的氧化损伤仍存在剂量效应。结论 OA可以通过PPARγ抑制x-LDL诱导HUVECs细胞氧化损伤。
  【关键词】 齐墩果酸; ox-LDL; 氧化损伤; PPARγ; 人脐静脉内皮细胞 
 
 
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