高糖通过诱导自噬障碍促进心肌细胞H9c2凋亡

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2018年第8卷第3期 栏目: 论著

作者:方媛,郭统帅,吴岳,等

单位:

关键词:

页码:134-139

摘要:

【摘要】 目的 探讨自噬对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法 MTT法检测H9c2细胞活力;hoechst33258染色法检测凋亡细胞;Western Blot检测H9c2细胞促凋亡蛋白Bax和自噬相关蛋白(Beclin-1和P62)的表达。各组的OD值和蛋白条带灰度值均采用析因设计的方差分析,各组间差异用单因素ANOVA分析。结果 HG能诱导H9c2细胞活力降低:12、24、48 mmol/L的HG细胞活力分别为Control组(100﹪)的[(79.5±2.23)﹪](t = 3.143,P = 0.043)、[(54.6±3.08)﹪](t = 12.425,P = 0.000)和[(37.2±2.59)﹪](t = 13.761, P = 0.000);与Control组(100﹪)比较,甘露醇等渗对照组的细胞活力值为[(101.0±1.27)﹪](t = 0.012,P = 0.094)。HG诱导H9c2细胞hoechst33258阳性细胞增加,且能诱导促凋亡蛋白Bax表达增加:与Control组比较,12、24、48 mmol/L的HG处理组凋亡蛋白Bax/β-actin灰度值分别为(1.29±0.25,t = 2.32,P = 0.045)、(1.42±0.23,t = 10.247,P = 0.000)和(1.81±0.29,t = 16.324,P = 0.000)。HG诱导自噬障碍:与Control组比较,自噬相关蛋白Beclin-1/β-actin灰度值分别为(0.82±0.16,t = 4.243,P = 0.032)、(0.78±0.19,t = 11.341,P = 0.000)和(0.62±0.11,t = 13.455,P = 0.000),P62蛋白/β-actin蛋白灰度值分别为(1.29±0.25,t = 4.442,P = 0.014)、(1.42±0.23,t = 13.341,P = 0.000)和(1.81±0.29,t = 15.851,P = 0.000)。自噬诱导剂雷帕霉素可逆转HG诱导的hoechst33258阳性细胞增加,且逆转HG诱导的Bax表达升高:与control组比较,HG组、HG和雷帕霉素共处理组、雷帕霉素组的Bax/β-actin灰度值分别为(1.51±0.31,t = 14.342,P = 0.000)、(1.42±0.23,t = 9.621,P = 0.004)和(1.81±0.12,t = 0.172,P = 0.124)。结论 HG可促进心肌细胞H9c2凋亡,且能诱导自噬障碍,自噬诱导剂的运用逆转了HG对H9c2细胞的凋亡作用,表明自噬障碍是HG诱导H9c2细胞凋亡的重要机制。
【关键词】 自噬; 高糖; 细胞凋亡; 心肌细胞
【摘要】 目的 探讨自噬对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法 MTT法检测H9c2细胞活力;hoechst33258染色法检测凋亡细胞;Western Blot检测H9c2细胞促凋亡蛋白Bax和自噬相关蛋白(Beclin-1和P62)的表达。各组的OD值和蛋白条带灰度值均采用析因设计的方差分析,各组间差异用单因素ANOVA分析。结果 HG能诱导H9c2细胞活力降低:12、24、48 mmol/L的HG细胞活力分别为Control组(100﹪)的[(79.5±2.23)﹪](t = 3.143,P = 0.043)、[(54.6±3.08)﹪](t = 12.425,P = 0.000)和[(37.2±2.59)﹪](t = 13.761, P = 0.000);与Control组(100﹪)比较,甘露醇等渗对照组的细胞活力值为[(101.0±1.27)﹪](t = 0.012,P = 0.094)。HG诱导H9c2细胞hoechst33258阳性细胞增加,且能诱导促凋亡蛋白Bax表达增加:与Control组比较,12、24、48 mmol/L的HG处理组凋亡蛋白Bax/β-actin灰度值分别为(1.29±0.25,t = 2.32,P = 0.045)、(1.42±0.23,t = 10.247,P = 0.000)和(1.81±0.29,t = 16.324,P = 0.000)。HG诱导自噬障碍:与Control组比较,自噬相关蛋白Beclin-1/β-actin灰度值分别为(0.82±0.16,t = 4.243,P = 0.032)、(0.78±0.19,t = 11.341,P = 0.000)和(0.62±0.11,t = 13.455,P = 0.000),P62蛋白/β-actin蛋白灰度值分别为(1.29±0.25,t = 4.442,P = 0.014)、(1.42±0.23,t = 13.341,P = 0.000)和(1.81±0.29,t = 15.851,P = 0.000)。自噬诱导剂雷帕霉素可逆转HG诱导的hoechst33258阳性细胞增加,且逆转HG诱导的Bax表达升高:与control组比较,HG组、HG和雷帕霉素共处理组、雷帕霉素组的Bax/β-actin灰度值分别为(1.51±0.31,t = 14.342,P = 0.000)、(1.42±0.23,t = 9.621,P = 0.004)和(1.81±0.12,t = 0.172,P = 0.124)。结论 HG可促进心肌细胞H9c2凋亡,且能诱导自噬障碍,自噬诱导剂的运用逆转了HG对H9c2细胞的凋亡作用,表明自噬障碍是HG诱导H9c2细胞凋亡的重要机制。
【关键词】 自噬; 高糖; 细胞凋亡; 心肌细胞
  【摘要】 目的 探讨自噬对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法 MTT法检测H9c2细胞活力;hoechst33258染色法检测凋亡细胞;Western Blot检测H9c2细胞促凋亡蛋白Bax和自噬相关蛋白(Beclin-1和P62)的表达。各组的OD值和蛋白条带灰度值均采用析因设计的方差分析,各组间差异用单因素ANOVA分析。结果 HG能诱导H9c2细胞活力降低:12、24、48 mmol/L的HG细胞活力分别为Control组(100﹪)的[(79.5±2.23)﹪](t = 3.143,P = 0.043)、[(54.6±3.08)﹪](t = 12.425,P = 0.000)和[(37.2±2.59)﹪](t = 13.761, P = 0.000);与Control组(100﹪)比较,甘露醇等渗对照组的细胞活力值为[(101.0±1.27)﹪](t = 0.012,P = 0.094)。HG诱导H9c2细胞hoechst33258阳性细胞增加,且能诱导促凋亡蛋白Bax表达增加:与Control组比较,12、24、48 mmol/L的HG处理组凋亡蛋白Bax/β-actin灰度值分别为(1.29±0.25,t = 2.32,P = 0.045)、(1.42±0.23,t = 10.247,P = 0.000)和(1.81±0.29,t = 16.324,P = 0.000)。HG诱导自噬障碍:与Control组比较,自噬相关蛋白Beclin-1/β-actin灰度值分别为(0.82±0.16,t = 4.243,P = 0.032)、(0.78±0.19,t = 11.341,P = 0.000)和(0.62±0.11,t = 13.455,P = 0.000),P62蛋白/β-actin蛋白灰度值分别为(1.29±0.25,t = 4.442,P = 0.014)、(1.42±0.23,t = 13.341,P = 0.000)和(1.81±0.29,t = 15.851,P = 0.000)。自噬诱导剂雷帕霉素可逆转HG诱导的hoechst33258阳性细胞增加,且逆转HG诱导的Bax表达升高:与control组比较,HG组、HG和雷帕霉素共处理组、雷帕霉素组的Bax/β-actin灰度值分别为(1.51±0.31,t = 14.342,P = 0.000)、(1.42±0.23,t = 9.621,P = 0.004)和(1.81±0.12,t = 0.172,P = 0.124)。结论 HG可促进心肌细胞H9c2凋亡,且能诱导自噬障碍,自噬诱导剂的运用逆转了HG对H9c2细胞的凋亡作用,表明自噬障碍是HG诱导H9c2细胞凋亡的重要机制。
 
  【关键词】 自噬; 高糖; 细胞凋亡; 心肌细胞
 
 
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