CHOP双重调控衣霉素诱导的DU-145细胞凋亡及自噬的研究

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2018年第8卷第5期 栏目: 论著

作者:雷艳,詹世淮,陈俊秋,等

单位:

关键词:

页码:257

摘要:

【摘要】 目的 研究内质网应激分子CHOP调控细胞凋亡与自噬的作用和机制。方法 利用衣霉素诱导DU-145细胞产生内质网应激,Western Blot法检测内质网应激相关分子Grp78、Grp94、p-eIF2α和CHOP及自噬蛋白LC3Ⅱ、Atg5和Beclin1的表达;用流式细胞术检测细胞凋亡水平;沉默CHOP基因,用Western Blot法检测凋亡蛋白PARP、Caspase3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡;并利用免疫荧光检测自噬标志性蛋白LC3B的表达。结果 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激能诱导一定程度的细胞凋亡,衣霉素处理8、12、24 h的细胞凋亡率分别为3.27﹪±1.02﹪,8.97﹪±0.71﹪和11.67﹪±1.41﹪,处理12 h及24 h的细胞凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P < 0.01)。同时也能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活DU-145细胞自噬。CHOP基因沉默抑制细胞凋亡,shCtrl组细胞凋亡率为32.17﹪±3.93﹪,shCHOP-1组细胞凋亡率为23.53﹪±3.41﹪,两组相比差异具有统计学意义(P < 0.05)。且CHOP基因沉默能促进细胞自噬分子LC3B的表达。结论 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激状态下,CHOP在细胞凋亡与自噬之间发挥双重调控作用。
【关键词】 内质网应激; 细胞自噬; 细胞凋亡; DU-145; 衣霉素 
【摘要】 目的 研究内质网应激分子CHOP调控细胞凋亡与自噬的作用和机制。方法 利用衣霉素诱导DU-145细胞产生内质网应激,Western Blot法检测内质网应激相关分子Grp78、Grp94、p-eIF2α和CHOP及自噬蛋白LC3Ⅱ、Atg5和Beclin1的表达;用流式细胞术检测细胞凋亡水平;沉默CHOP基因,用Western Blot法检测凋亡蛋白PARP、Caspase3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡;并利用免疫荧光检测自噬标志性蛋白LC3B的表达。结果 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激能诱导一定程度的细胞凋亡,衣霉素处理8、12、24 h的细胞凋亡率分别为3.27﹪±1.02﹪,8.97﹪±0.71﹪和11.67﹪±1.41﹪,处理12 h及24 h的细胞凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P < 0.01)。同时也能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活DU-145细胞自噬。CHOP基因沉默抑制细胞凋亡,shCtrl组细胞凋亡率为32.17﹪±3.93﹪,shCHOP-1组细胞凋亡率为23.53﹪±3.41﹪,两组相比差异具有统计学意义(P < 0.05)。且CHOP基因沉默能促进细胞自噬分子LC3B的表达。结论 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激状态下,CHOP在细胞凋亡与自噬之间发挥双重调控作用。
【关键词】 内质网应激; 细胞自噬; 细胞凋亡; DU-145; 衣霉素 
【摘要】 目的 研究内质网应激分子CHOP调控细胞凋亡与自噬的作用和机制。方法 利用衣霉素诱导DU-145细胞产生内质网应激,Western Blot法检测内质网应激相关分子Grp78、Grp94、p-eIF2α和CHOP及自噬蛋白LC3Ⅱ、Atg5和Beclin1的表达;用流式细胞术检测细胞凋亡水平;沉默CHOP基因,用Western Blot法检测凋亡蛋白PARP、Caspase3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡;并利用免疫荧光检测自噬标志性蛋白LC3B的表达。结果 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激能诱导一定程度的细胞凋亡,衣霉素处理8、12、24 h的细胞凋亡率分别为3.27﹪±1.02﹪,8.97﹪±0.71﹪和11.67﹪±1.41﹪,处理12 h及24 h的细胞凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P < 0.01)。同时也能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活DU-145细胞自噬。CHOP基因沉默抑制细胞凋亡,shCtrl组细胞凋亡率为32.17﹪±3.93﹪,shCHOP-1组细胞凋亡率为23.53﹪±3.41﹪,两组相比差异具有统计学意义(P < 0.05)。且CHOP基因沉默能促进细胞自噬分子LC3B的表达。结论 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激状态下,CHOP在细胞凋亡与自噬之间发挥双重调控作用。
【关键词】 内质网应激; 细胞自噬; 细胞凋亡; DU-145; 衣霉素 
 
 
 下载信息  [文件大小:6.24 MB 下载次数: 次]
点击下载文件:CHOP双重调控衣霉素诱导的DU-145细胞凋亡及自噬的研究