外泌体MicroRNA-1246促进星形胶质瘤细胞增殖与侵袭的研究

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2018年第8卷第5期 栏目: 论著

作者:解学军 张冰

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页码:292

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【摘要】 目的 探讨星形胶质瘤细胞来源的外泌体中microRNA-1246(miRNA-1246)是否作用于星形胶质瘤细胞,促进其增殖与侵袭。方法 实验分为对照组、miRNA-1246抑制剂组与miRNA-1246模拟物组,各组设6个复孔。首先从患者血液中分离外泌体并鉴定其成分。通过基质胶包被的Transwell小室实验检测星形胶质瘤细胞在miRNA-1246作用下侵袭能力的变化,CCK-8实验检测细胞增殖能力。利用荧光素酶报告基因验证miRNA-1246是否靶向细胞黏附分子1(CADM1)基因。最后通过Western Blot实验与RT-qPCR实验检测癌症组织中CADM1蛋白水平的含量并分析其与胶质瘤的关系。采用方差分析和 t 检验进行统计学分析。结果 恶性胶质瘤患者血液循环外泌体中miRNA-1246的含量为2.83±1.70,高于对照组1.00±0.50,差异具有统计学意义(t = 6.044,P = 0.026)。转染miRNA-1246抑制剂后细胞CADM1蛋白水平为1.79±0.17,高于对照组1.00±0.09(t = 4.576,P = 0.017),细胞侵袭数量为(48.40±5.90)个,低于对照组96.50±6.70,而转染miRNA-1246模拟物后细胞侵袭数量为(123.20±9.80)个,高于对照组(96.50±6.70)个(t = 5.258,P = 0.002)。CCK-8实验中转染miRNA-1246抑制剂组A450值为0.49±0.08,低于对照组0.76±0.06,而转染miRNA-1246模拟物组A450值为1.03±0.09,显著升高(F = 33.82,P = 0.005)。荧光素酶报告实验表明细胞转染miR- 1246模拟物后荧光强度为4.98±1.86,低于对照组10.34±2.60(t = 7.235,P = 0.006),而CADM1-Mut组内之间比较差异无统计学意义。结论 胶质瘤细胞外泌体中的miRNA-1246可通过靶向CADM1基因抑制蛋白表达,促进胶质瘤细胞的增殖与转移,提示循环外泌体中的miRNA-1246可作为恶性胶质瘤诊断与治疗的潜在靶点。
【关键词】  MicroRNA; 神经胶质瘤; 细胞黏附分子; 细胞增殖; 细胞侵袭
 
 
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