长链非编码RNA Hotair通过调控巨噬细胞表型转换促进胃癌细胞增殖与侵袭

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2019年第9卷第1期 栏目: 论著

作者:李燕,周雄坤,刘静,等

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页码:23-28

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【摘要】 目的 探讨胃癌细胞是否通过长链非编码RNA Hotair作用于巨噬细胞,将其转化为癌症支持细胞,进而促进胃癌的增殖与侵袭。方法 实验分为对照组与AGS细胞共培养组,转染实验分为对照组、Hotair过表达组和RNA干扰组胃癌细胞与巨噬细胞共培养实验检测巨噬细胞表型转换。进行原位杂交实验对M2型巨噬细胞与lncRNA Hotair共定位。通过RT- PCR实验检测并筛选出促进巨噬细胞表型转换的关键lncRNA。通过RNA干扰技术敲低胃癌细胞lncRNA水平并进行共培养实验。随后通过CCK-8实验与Transwell实验检测转型后的癌症相关巨噬细胞对胃癌细胞增殖与侵袭能力的影响。两组间均数比较采用t检验,多组均数间比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNK-q检验。结果 共培养实验结果表明,相比于对照组(5.63±1.97)个,AGS细胞组中含有更多的CD206阳性M2型癌症相关巨噬细胞(32.51±5.44)个,两者比较差异有统计学意义(t =25.742,P = 0.001);ELISA实验也证明AGS细胞组的巨噬细胞分泌更多的抑炎因子[TGF-β:(163.45±54.91)pg/ml,对照组:(87.32±19.24) pg/ml;IL-4:(156.83±69.25)pg/ml,对照组:(49.94±17.55)pg/ml;IL-10:(385.65±24.75)pg/ml,对照组:(98.82±46.26)pg/ml],两组间比较差异有统计学意义(t = 7.167,8.203,29.991,P均< 0.05)。GEO数据库鉴定并使用RT-PCR筛选出Hotair为关键lncRNA,随后的RNA干扰实验表明,Hotair敲低会抑制巨噬细胞的转变(CD206阳性细胞数量由41.12±6.91变为21.45±2.19),进而降低胃癌细胞的增殖与侵袭能力。结论 胃癌细胞的lncRNA Hotair会被巨噬细胞摄取,将其转化为癌症相关巨噬细胞,进而促进胃癌细胞的增殖与侵袭能力,这为胃癌的治疗提供了新的可能的靶点。
【关键词】  lncRNA; 胃癌; 巨噬细胞; 细胞增殖; 细胞侵袭