二甲双胍对人脐带间充质干细胞形态、增殖、表面标志及细胞周期的影响

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2019年第9卷第4期 栏目: 论著

作者:弓勋 云升

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页码:224

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【摘要】 目的 探讨不同浓度二甲双胍(METF)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)形态、增殖、表面标志及细胞周期的影响。方法 取健康足月新生儿脐带在体外分离出hUC-MSC进行传代培养,至第3代(流式细胞仪分析)对细胞进行鉴定,取第6代处于对数生长期的hUC-MSC (相对老化),将对照组与不同浓度METF (0.1,1,5,10,20 mmol/L)干预的细胞进行比较,观察不同浓度METF干预对细胞的形态、增殖率(MTT法分别于24、48、72 h检测)、及细胞表面标志和细胞周期的影响,采用One-Way ANOVA,及LSD-t检验进行统计学分析。结果 (1)METF为0.1 mmol/L、1 mmol/L,细胞形态无显著改变,当药物浓度为5 ~ 20 mmol/ L时,随着药物浓度增加、培养时间延长,细胞形态改变越显著。(2)METF为0.1 mmol/L(24 h:101.28±0.98,24 h:104.06±1.76,24 h:101.51±0.67)促进hUC-MSC增殖,药物浓度为1 ~ 10 mmol/L在培养初期可增加间充质干细胞的增殖率,随着培养时间的延长,细胞的增殖逐渐被抑制。METF为20 mmol/L(24 h:86.64±0.66,48 h:58.38±2.52,72 h:17.75±1.35)抑制细胞增殖,抑制作用随着时间延长而增强(P < 0.05)。(3)当METF浓度为5,10,20 mmol/L时,随着药物浓度的增加,CD105的表达逐渐减弱(F = 17.539,P < 0.05)。METF未对CD44、CD90产生影响。(4)METF为0.1 mmol/L时降低G0/G1期的比例(64.16±1.20,P < 0.05),促进间充质干细胞的增殖,随着药物浓度的增加,细胞增殖逐渐被抑制。结论 METF浓度在0.1mmol/ L促进hUC-MSC增殖,而在浓度5 ~ 20 mmol/L时抑制人脐带间充质干细胞的增殖及表面标志CD105的表达,不同浓度的METF均未对CD44、CD90的表达产生影响。
【关键词】 脐带间充质干细胞; 二甲双胍; 生物治疗; 细胞增殖