miR-98-5p靶向PYGO2基因对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2020年第10卷第3期 栏目: 论著

作者:首泉 王茜 谭志远

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页码:138

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【摘要】 目的 探讨miR-98-5p对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其作用机制。方法 选取2016年1月至2019年1月郴州市第一人民医院收治的宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织;予以miR-98-5p、si-PYGO2及anti-miR-98-5p单独或共培养Siha细胞,记为:miR- NC组、miR-98-5p组、si-NC组、si-PYGO2组、anti-miR-NC组、anti-miR-98-5p组、miR-98- 5p+pcDNA组、miR-98-5p+pcDNA-PYGO2组。运用qRT-PCR检测宫颈癌组织和细胞中miR-98-5p和PYGO2 mRNA的表达水平;Western blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;将WT-PYGO2、MUT-PYGO2分别与miR-NC、miR-98-5p共转染至Siha细胞中,双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结 果 与癌旁组织相比,宫颈癌组织中miR-98-5p表达水平降低 (0.98±0.08比0.47±0.05),PYGO2 mRNA (1.00±0.07比2.43±0.24)和蛋白表达水平 (0.27±0.03比0.62±0.05)均升高 (P 均 < 0.001)。与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比,宫颈癌细胞Siha、Hela、Caski中PYGO2 mRNA (0.98±0.09比2.76±0.23、2.46±0.24、2.55±0.21)和蛋白表达水平 (0.21±0.03比0.62±0.06、0.51±0.05、0.57±0.06)升高;miR-98-5p的表达水平降低 (1.00±0.08比0.34±0.04、0.56±0.05、0.46±0.04) (P均< 0.05)。与miR-NC组相比,miR-98-5p组宫颈癌Siha细胞活性 (48 h:0.61±0.05比0.42±0.04,72 h:1.02±0.09比0.59±0.06)、迁移数量[ (112.46±10.27)个比 (48.35±4.96)个]及侵袭数量[ (92.47±9.56) 个比 (39.46±3.52)个]均降低 (P均 < 0.05)。与si-NC组相比,si-PYGO2组宫颈癌Siha细胞活性 (48 h:0.64±0.06比0.46±0.05,72 h:1.05±0.08比0.67±0.06)、Siha迁移数量[ (106.48±9.75) 个比(42.16±4.25) 个 ]和侵袭数量[ (87.63±8.11)个比(35.42±6.20)个]均降低 (P均< 0.05);Cyclin D1、MMP-2、MMP- 9、MMP-14表达水平降低,p21、p27表达水平升高,差异有统计学意义 (P均< 0.05)。与miR-NC组比较,miR-98-5p组转染WT-PYGO2的Siha细胞荧光素酶活性 (0.38±0.04比0.99±0.08)降低 (P < 0.05),转染MUT-PYGO2的Siha细胞荧光素酶活性 (1.03±0.08比1.01±0.09)差异无统计学意义(P > 0.05)。PYGO2过表达逆转了miR-98-5p过表达对宫颈癌Siha细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-98-5p可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与其靶向调控PYGO2的表达有关,将可为宫颈癌的预防和治疗提供新靶点。
 

【关键词】 miR-98-5p; PYGO2; 宫颈癌; 增殖; 迁移; 侵袭