lncRNA MAGI2-AS3下调miR-31-5p抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭并促进凋亡

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2020年第10卷第4期 栏目: 论著

作者:龚年金 李光才 张明华等

单位:

关键词:

页码:204-212

摘要:

【摘要】 目的 研究lncRNA MAGI2-AS3对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响和潜在的分子机制。方法 根据转染载体不同将A549细胞分为pcDNA3.1组 (转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-MAGI2-AS3组 (转染pcDNA3.1-MAGI2-AS3)、anti-miR-NC组 (转染anti-miR-NC)、anti-miR-31-5p组 (转染anti-miR-31-5p)、pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-MAGI2-AS3和miR-NC)、pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-31-5p组 (共转染pcDNA3.1-MAGI2-AS3和miR-31-5p mimics)。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测miR- 31- 5p和MAGI2-AS3 RNA的表达,四氮唑蓝 (MTT)法测定A549细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告系统验证MAGI2-AS3与miR-31-5p的调控关系,流式细胞术检测细胞凋亡与周期。两组间比较采用独立样本t检验进行分析;多组间比较采用单因素方差分析,组内多重比较采用SNK-q检验。结果 与人正常肺细胞HBE相比,肺癌细胞A549中的MAGI2- AS3表达量(0.48±0.03比1.29±0.06)降低,miR-31-5p表达量 (1.01±0.05比0.25±0.02)升高;与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-MAGI2-AS3组A549细胞活力 (0.48±0.04比0.77±0.06)、迁移[(81.33±2.87)个比 (124.33±3.09)个]和侵袭[(32.00±2.83)个比(53.00±3.27)个]细胞数、S期细胞所占比例 (23.01﹪±1.00﹪比32.95﹪±1.06﹪)均降低,凋亡率 (19.95﹪±1.25﹪比7.23﹪± 0.51﹪)、G0-G1期细胞所占比例 (43.58﹪±2.15﹪比33.56﹪±1.23﹪)均升高;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-31-5p组A549细胞活力 (0.53±0.04比0.78±0.06)、迁移[(76.00±3.74)个比 (108.33±2.87)个]和侵袭[(30.00±1.63)个比(42.33± 2.05)个]细胞数、S期细胞所占比例 (24.43﹪±1.13﹪比32.91﹪±1.08﹪)降低,凋亡率 (18.21﹪±1.24﹪比7.29﹪±0.51﹪)、G0-G1期细胞所占比例 (41.56﹪±2.19﹪比33.53﹪ ± 1.27﹪)升高,差异有统计学意义 (P均< 0.05);双荧光素酶报告系统结果显示,MAGI2- AS3靶向负调控miR-31-5p的表达。与pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-NC组比较,pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-31-5p组A549细胞活力 (0.68±0.06比0.50±0.04)、迁移[(91.00 ± 1.63)个比 (52.67±2.62)个]和侵袭[(62.67±2.49)个比(31.67±4.03个)]细胞数升高,凋亡率 (10.59﹪±1.0﹪比21.11﹪±1.14﹪)降低,差异有统计学意义 (P 均 < 0.05)。结论 lncRNA MAGI2-AS3通过靶向miR-31-5p抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。lncRNA MAGI2-AS3是肺癌潜在分子治疗靶点。
【关键词】 肺癌; A549细胞; MAGI2-AS3;  MiR-31-5p;  增殖;  迁移;  侵袭;  凋亡