人脐带间充质干细胞对脂多糖活化的小胶质细胞BV-2表型的影响

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2020年第10卷第4期 栏目: 论著

作者:梅亚波 张万巧 陈冲等

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页码:213-218

摘要:

【摘要】 目的 探讨人脐带间充质干细胞 (hUCMSCs)对脂多糖 (LPS)活化的小胶质细胞功能表型的影响。方法 实验设未诱导对照组 (加入PBS无LPS诱导的BV-2细胞),LPS诱导组 (加入1.0 μg/mL的LPS诱导BV-2细胞向M1型分化),按比例加入不同浓度hUCMSCs进行干预 (LPS+低、中、高浓度hUCMSCs干预组hUCMSCs与BV-2细胞比例分别为:1:100、1:10、1:1),分别于24、48、72 h观察BV-2形态变化,Griess法检测细胞培养上清中M1表型产物一氧化氮 (NO)的浓度;将hUCMSCs与BV-2细胞在不同条件下 (LPS+/LPS-)共培养,qRT-PCR检测BV-2细胞M2表型标记物精氨酸酶1表达变化。数据分析采用重复测量资料的方差分析,组间比较采用Tukey分析。结果 BV-2细胞经LPS诱导后活化,细胞变大,呈“煎饼状”、“阿米巴状”变化,呈经典的M1表型分化;与未诱导对照组相比,LPS诱导组48、72 h BV-2细胞NO含量升高[48 h:(0.507±0.012)μg/mL比 (5.183±0.171)μg/ mL;72 h:(0.934±0.024)μg/ mL比 (12.498±0.168) μg/mL,P均< 0.01],与LPS诱导组比较,LPS+ 低、中、高浓度hUCMSCs干预组72 h [(12.498±0.168)μg/mL比 (11.852±0.149)μg/ mL、(9.796±0.048)μg/mL、(1.876±0.063) μg/mL]及LPS+中、高浓度hUCMSCs干预组48 h NO含量[(5.183±0.171) μg/ mL比 (3.921±0.066)μg/mL、(1.202±0.012)μg/ mL]降低,且呈干预浓度依赖性NO含量下降,差异均有统计学意义 (P均 < 0.01)。精氨酸酶1 qRT- PCR结果显示:与未诱导组比较,单纯高浓度hUCMSCs干预组3个时间点精氨酸酶1的相对表达量均升高 (1.046±0.057比19.266±0.641,1.114±0.093比16.977±0.749,1.139±0.118比16.959±0.625),与LPS诱导对照组 (0.000)比较,未诱导对照组 (1.046±0.057,1.114±0.093,1.139±0.118)及LPS+高浓度hUCMSCs干预组精氨酸酶1表达 (0.879±0.077,1.023±0.081,1.121±0.078)升高,差异具有统计学意义 (P均 < 0.01)。结论 LPS可诱导小胶质细胞BV-2炎症反应,而hUCMSCs可抑制活化小胶质细胞的炎症反应,抵消LPS对BV-2的诱导效应,促进小胶质细胞由促炎的M1型向抗炎的M2型转变。
【关键词】 脂多糖; 间充质干细胞; BV-2细胞