柚皮苷对高糖作用下MC3T3-E1细胞活力和Akt通路相关因子表达的影响

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2020年第10卷第6期 栏目: 论著

作者:林春淑 舒晓春 肖菲娜 等

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页码:321

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【摘要】 目的 探讨柚皮苷 (NG)对高糖环境下MC3T3-E1细胞活力的影响及可能的分子机制。方法 体外培养小鼠MC3T3-E1细胞,实验分5组:对照组 (正常无血清培养基)、高糖组 (含25 mmol/L葡萄糖)、0.1 μmol/L +高糖组 (0.1 μmol/L NG + 25 mmol/L葡萄糖)、1 μmol/ L + 高糖组 (1 μmol/L NG+25 mmol/L葡萄糖)、10 μmol/L +高糖组 (10 μmol/L NG+25 mmol/L葡萄糖)。药物干预后,采用CCK-8法检测细胞活力;实时荧光定量PCR (qPCR)法检测细胞成骨特异性转录因子 (Runx2)、胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)、蛋白激酶 (Akt1)mRNA的表达;蛋白质印迹法 (Western blot)检测细胞碱性磷酸酶 (ALP)、Akt1、IGF-1蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果 CCK8检测结果显示,与对照组比较,高糖组细胞OD值 (12 h:0.90±0.01比0.80±0.01,24 h:1.00±0.05比0.84±0.01,48 h:1.09±0.03比0.90±0.01)均降低,差异有统计学意义 (P < 0.01);与高糖组比较,0.1 μmol/L+高糖组细胞OD值 (24 h:0.84±0.01比0.93±0.05,48 h:0.90±0.01比0.99±0.01)、1 μmol/ L +高糖组和10 μmol/L+高糖组OD值 (12 h:0.80±0.01比0.92±0.01、1.01±0.32,24 h:0.84±0.01比1.01±0.04、1.16±0.03,48 h:0.90±0.01比1.12±0.02、1.20±0.02)均升高,差异有统计学意义(P < 0.05)。与对照组比较,高糖组细胞Runx2、IGF-1、Akt1的mRNA的表达水平 (24 h:1.00比0.34±0.02、1.00比0.34±0.01、1.00比0.15±0.02)、(48 h:1.00比0.72±0.03、1.00比1.09±0.07、1.00比0.38±0.04)降低,差异有统计学意义 (P < 0.01)。与高糖组比较,1 μmol/L +高糖组和10 μmol/L+高糖组细胞Runx2、IGF-1、Akt1的mRNA表达水平 (24 h:0.34±0.02比0.62±0.09、0.64±0.05,0.34±0.01比0.77±0.03、1.02±0.07,0.15±0.02比0.24±0.08、0.4±0.09)、(48 h:0.72±0.03比1.27±0.02、1.37±0.02,1.09±0.07比2.44±0.19、2.73±0.04,0.38±0.04比0.86±0.06、1.43±0.03)均升高,差异有统计学意义 (P < 0.05)。与对照组比较,高糖组细胞ALP、Akt1、IGF-1蛋白表达水平(48 h:1.00比0.72±0.02、1.00比0.89±0.03、1.00比0.09±0.01)均降低,差异有统计学意义 (P < 0.05);与高糖组比较,0.1 μmol/L+高糖组、1 μmol/L+高糖组和10 μmol/L+高糖组ALP、Akt1、IGF-1蛋白表达水平 (48 h:0.72±0.02比1.92±0.02、2.30±0.30、3.09±0.10,0.89±0.03比1.50 ± 0.03、1.43±0.04、1.40±0.13,0.09±0.01比1.75±0.01、2.30±0.31、2.07±0.07)均升高,差异有统计学意义 (P < 0.05)。结论 NG逆转高糖诱导的MC3T3-E1细胞活力减退;同时改善高糖的抑制作用,促进MC3T3-E1细胞IGF- 1、AKt-1、Runx2 mRNA和IGF-1、AKt-1、ALP蛋白的表达。
【关键词】 柚皮苷; 高糖; 骨质疏松; MC3T3-E1细胞; Akt通路