骨髓间充质干细胞对移植肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2011年第1卷第1期 栏目: 实验研究

作者:卓文利 徐廷昭 吴卫真等

单位:

关键词:间充质干细胞 肾脏 缺血再灌注损伤 氧自由基

页码:14-24

摘要:

目的  观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对移植肾缺血再灌注损伤(IRI)模型修复的保护作用,及其作用机制的思路。方法  (1)采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD大鼠骨髓MSCs,观察其形态,流式细胞仪检测细胞表面标记,检测骨髓MSCs向成骨和成脂细胞分化的潜能;(2)成年雌性SD大鼠28只,随机分组:正常对照组(control group,n=6),假手术对照组(sham-operated group,n=6),移植肾IRI组(vehicle-treated I/R group,n=8),经尾静脉输注间充质干细胞(MSCs)移植肾IRI组(MSCs-treated via tail vein I/R group,n=8)。检测肾功能指标血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平变化,评定肾小管的凋亡指数和增殖指数,测定肾组织起氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及微量丙二醛(MDA)水平,以及对肾脏病理学变化进行观察。结果  (1)分离培养的骨髓MSCs纯度高、生物学特征稳定;(2)移植肾IRI组肾功能指标(BUN36.9±4.8,Scr279.9±22.6)、氧化应激指标明显升高,组织形态学出现肾间质水肿明显,肾小管上皮细胞空泡样变性,近曲小管管壁肿胀,管腔变小。而经尾静脉输注MSCs移植肾IRI组大鼠肾功能指标(BUN22.6±7.8,Scr223.6±26.7)和氧化应激指标得到明显改善(P<0.05),组织形态学肾小管上皮细胞细胞核固缩、碎裂和溶解等细胞坏死和变性征象明显减轻,肾小管上皮细胞增殖指数(PI)高于IRI组,肾小管上皮细胞凋亡指数(AI)低于IRI组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论  骨髓MSCs输注能促进肾脏IRI损伤后肾脏细胞增殖,抑制肾脏细胞凋亡,降低血清Creatinine和BUN,在一定程度上促进IRI后肾功能的恢复,通过抑制氧自由基的生成减轻肾组织的损伤程度,改善肾功能。